科研抗体定制

服务内容

科研院校需向我单位提供详细的抗体资料，并支付一笔经费；我司将在4-6个月完成定制服务。

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服务介绍

多抗制备服务

大多数天然抗原物质(如细菌或其分泌的外毒素以及各种组织成分等)往往具有多种不同的抗原决定簇，而每一决定簇都可刺激机体产生一种特异性抗体。 多克隆抗体是多个抗原决定簇刺激机体后，由多个免疫淋巴细胞分泌的多种抗体的混合物。
由于这种抗体是不均一的，无论是对抗体分子结构与功能的研究或是临床应用都受到很大限制，因此称为第一代抗体

单抗制备服务

在机体淋巴组织内可存在千百种抗体形成细胞(即B细胞)，每种抗体形成细胞只识别其相应的抗原决定簇，当受抗原刺激后可增殖分化为一种细胞群，这种由单一细胞增殖形成的细胞群体可称为细胞克隆(clone)。

同一克隆的B细胞可合成和分泌在理化性质、分子结构、遗传标记以及生物学特性等方面都是完全相同的均一性抗体，亦可称之为单克隆抗体。单克隆抗体为只针对某一特定的抗原决定簇，纯度高的抗体，因此称为第二代抗体。

1、优点
（1）制备时不需纯化抗原就可得到纯抗体；   （2）有很高的效价
（3）有高度的单一性、均一性；          （4）产量高，且可连续生产

2、单克隆抗体制备基本原理

体内免疫法很难获得单克隆抗体，如能将所需要的抗体形成细胞选出，并能在体外进行培养，就可以获得已知特异的单克隆抗体。

杂交瘤细胞：既具有骨髓瘤细胞能大量无限生长繁殖的特性，又具有抗体形成细胞合成和分泌抗体的能力。这种抗体是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体，故称之为单克隆抗体。
应用杂交瘤技术可获得几乎所有抗原的单克隆抗体，只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。
（1）DNA合成
 ① 主要途径：参考生物化学，可被氨基喋呤(A)所阻断
 ② 旁路途径：利用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)合成DNA；
        所需要的酶为次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸腺嘧啶核苷激酶(TK)。
（2）骨髓瘤细胞：来源于BABC/ c小鼠的骨髓瘤细胞系；没有合成抗体的能力；体外具有无限生长繁殖的能力；丧失合成HGPRT和TK的能力；只能通过主要途径合成DNA；在含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 、胸腺嘧啶核苷(T)的HAT培养基中不能生长。
（3）免疫淋巴细胞：通常来源于BALB/c小鼠的脾淋巴细胞；具有合成抗体的能力；具有合成HGPRT和TK的能力；能通过主要途径和旁路途径合成DNA；HAT培养基中能生长，但短寿，只能存活几天，体外不具有无限生长繁殖的能力
（4）融合剂：Kohler和Milstein最早仙台病毒；后来发现聚乙二醇（PEG）的融合效果更好，且避免了病毒的污染问题。
（5）杂交瘤细胞：具有合成抗体的能力(从免疫淋巴细胞获得)；具有合成HGPRT和TK的能力(从免疫淋巴细胞获得)；能通过主要途径和旁路途径合成DNA；HAT培养基中能生长；体外具有无限生长繁殖的能力(从骨髓瘤细胞获得)。
（6）饲养细胞：单个或少数细胞在体外培养很难成活，必需加入其他细胞以增加细胞密度，维持其代谢，使之成活繁殖；被加入的这种细胞称为“饲养细胞”。最常用的小鼠腹腔巨噬细胞。

3、单克隆抗体制备过程：

制备抗原 → 免疫动物 → 免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备 → 细胞融合 → 杂交瘤细胞的选择培养 → 杂交瘤细胞的的筛选 → 杂交瘤细胞的克隆化 → 单克隆抗体的检定 → 杂交瘤细胞系的建立 → 单克隆抗体的大量制备（动物体内诱生法和体外培养法）

4、单克隆抗体的应用
（1）诊断试剂：用于各种病原体以及肿瘤的诊断。
（2）治疗试剂：兽医临床上传染病的治疗；医学临床上抑制器官移植排斥、治疗自身免疫疾病、制备生物导弹。
（3）检测试剂：各种病原体毒力因子的检测；各种免疫细胞及其它组织细胞表面分子的检测。